Enea Bastianini übernimmt die Führung in der zweiten MotoGP-Trainingssession in Portimão, während Marc Marquez seinen ersten Sturz der Saison erleidet. Marquez, der während der Tests nur einen Vorfall hatte und während des Rennens in Katar auf dem Motorrad blieb, stürzte am Ende der Session. Dies hatte jedoch keine signifikanten Auswirkungen auf seine Leistung, da er sich souverän einen Platz in Q2 sicherte. Bastianini fuhr die schnellste Runde in 1:38,057 Minuten, mehr als zwei Sekunden schneller als Marquez‘ vorherige Runde in der ersten Trainingssession. KTM’s Jack Miller war der nächstbeste Konkurrent von Bastianini, gefolgt von Marquez und Pramac’s Jorge Martin. Trotz eines frühen Sturzes belegte Millers Teamkollege Binder den fünften Platz. Marco Bezzecchi und Maverick Vinales zeigten ebenfalls starke Leistungen und belegten die Plätze sechs und sieben. Der amtierende Champion Pecco Bagnaia hatte anfangs Schwierigkeiten, einen Platz in den Top Ten zu sichern, konnte aber seine Zeit in der letzten Runde verbessern und belegte den achten Platz. Fabio Quartararo und Alex Rins, beide auf Yamaha, komplettierten die Top 10 und waren die ersten Fahrer, die sich in dieser Saison direkt mit japanischen Motorrädern für Q2 qualifizierten. LCR Honda’s Takaaki Nakagami belegte den 16. Platz, während Tech3 Gas Gas‘ Pedro Acosta der schnellste Fahrer war, der die automatische Qualifikation für Q2 verpasste. Mehrere Fahrer, darunter Aleix Espargaro, Alex Marquez, Luca Marini und Franco Morbidelli, erlitten Stürze während der Session. Morbidellis Sturz war besonders enttäuschend, da er den ganzen Tag über eine gute Leistung gezeigt hatte und in den Top Ten hätte sein können.
