En la sesión de entrenamientos de apertura en Jerez, el piloto de Gresini Ducati, Alex Márquez, tomó la delantera, superando a su hermano Marc, quien había liderado la mayor parte de la sesión. Durante la mayoría de los 45 minutos, fue un 1-2 de los Márquez. Sin embargo, Alex Márquez tomó la decisión estratégica de cambiar los neumáticos al final de la sesión, lo que le permitió superar a su hermano y terminar con el tiempo más rápido de 1m36.630s. Quedó medio segundo por delante de Marc Márquez y su compañero de equipo. Maverick Viñales, quien había dominado en el Circuito de las Américas, aseguró la tercera posición después de equipar un nuevo juego de neumáticos. Aleix Espargaró mejoró su posición en la última vuelta, terminando en cuarto lugar. Franco Morbidelli, en una Ducati de 2024, quedó en quinto lugar, mientras que otros pilotos en la misma moto, Jorge Martín, Pecco Bagnaia y Enea Bastianini, terminaron en noveno, 12º y 13º lugar, respectivamente. El piloto invitado de KTM, Dani Pedrosa, fue el más rápido entre los pilotos RC16, en sexto lugar, seguido de cerca por Brad Binder. Los otros pilotos invitados, Lorenzo Savadori y Stefan Bradl, terminaron en 23º y 24º lugar, empujando a Luca Marini a la última posición. Savadori está pilotando una moto experimental con nuevas características que Aprilia planea usar más adelante en la temporada. Por otro lado, la RC213V de Bradl ha experimentado cambios significativos en términos de aerodinámica y unidad de asiento en comparación con las motos regulares. Dos pilotos, Johann Zarco y Augusto Fernández, sufrieron accidentes durante la sesión, pero Zarco se recuperó rápidamente y volvió a ponerse de pie.
