Die zweite freie Trainingseinheit beim Großen Preis von Spanien war von Unfällen geprägt, was dazu führte, dass Pecco Bagnaia einen neuen Rundenrekord in Jerez aufstellte. Das KTM-Team hatte ebenfalls Schwierigkeiten während der Session. Maverick Vinales brach zunächst Bagnaia’s Pole-Position-Rekord von 2022, aber Bagnaia antwortete mit einer beeindruckenden Schlussleistung und beendete die Session mit einer Zehntelsekunde Vorsprung vor Vinales in einer Zeit von 1m36.025s. Es wird jedoch erwartet, dass dieser Rekord in der Samstagssession übertroffen wird. Marc Marquez, der im ersten Training gut abschnitt, war im Kampf um den Spitzenplatz in FP2, verlor aber im letzten Sektor an Boden. Marco Bezzecchi sicherte sich trotz eines frühen Sturzes den vierten Platz mit Hilfe des Windschattens von Bagnaia. Rookie Pedro Acosta hatte ebenfalls eine gute Leistung und beendete das Training in den Top 10. Jorge Martin, Aleix Espargaro, Enea Bastianini, Fabio Di Giannantonio und Alex Marquez sicherten sich den direkten Einzug in Q2. Brad Binder, der vielversprechendes Tempo zeigte, verpasste aufgrund eines späten Sturzes Q2. Jack Miller und Dani Pedrosa erreichten ebenfalls nicht Q2. Franco Morbidelli hatte Schwierigkeiten, eine konkurrenzfähige Rundenzeit zu setzen, während Alex Rins und Takaaki Nakagami über vier Zehntelsekunden hinter Q2 lagen. Mehrere Fahrer, darunter Vinales, Raul Fernandez, Miguel Oliveira, Alex Marquez und Fabio Quartararo, waren in Unfälle während der Session verwickelt.
