Francesco Bagnaia, il campione attuale della MotoGP, ha concluso al primo posto nella sessione di prove del venerdì a Mugello, con Alex Rins della Yamaha al secondo posto. Il tempo di giro di Bagnaia di 1m44.938s è stato di più di un quarto di secondo più veloce rispetto al resto del gruppo, rimanendo solo poco al di sotto del nuovo record della pista. Tuttavia, al momento Bagnaia è sotto indagine per aver ostacolato Alex Marquez durante la sessione. Nonostante ciò, la forte performance della Yamaha a Mugello è continuata, con Rins che ha mostrato la sua velocità e il debuttante Pedro Acosta che si è assicurato un posto nel Q2. La caduta di Acosta più presto nella giornata non ha ostacolato il suo progresso. Brad Binder della KTM ha avuto anche un tempo di giro promettente, ma è stato escluso a causa dei limiti del circuito. Miguel Oliveira della Trackhouse Aprilia ha avuto la sua migliore prestazione della stagione finora, terminando al quarto posto. Marc Marquez della Gresini Ducati è riuscito ad evitare l’eliminazione dal Q1 con il quinto tempo più veloce. Altre performance degne di nota sono arrivate da Enea Bastianini, Jorge Martin e Alex Marquez, tutti alla guida di Ducati. Maverick Vinales e Aleix Espargaro hanno garantito gli ultimi posti nel Q2 con le loro Aprilia. Fabio Quartararo della Yamaha ha concluso a un quarto di secondo di distanza da Rins, evitando per poco di partecipare al Q1. Takaaki Nakagami della Honda ha avuto una prestazione impressionante, superando i suoi compagni di squadra RC213V di più di quattro decimi di secondo.
